Один праймер плюс один образец — одна сиквенс реакция
Образец — плазмида или ампликон
Образцы и праймеры можно отправлять комнатной температуры, охлажденными или замороженными
Чистая выделенная плазмида сразу пригодна для сиквенс реакции
Концентрация плазмиды < 5 т.н. — от 50 нг/мкл
Концентрация плазмиды > 5 т.н. — от 100 нг/мкл
Надо 10 мкл плазмиды на 2 праймера плюс 4 мкл на каждый новый праймер
Ампликон необходимо отправить в течение недели после ПЦР
Ампликон надо подготовить: мы предлагаем три вида очистки, также можно почистить ампликон самостоятельно
Ферментная очистка и очистка на магнитных частицах подходит только при отсутствии нецелевых продуктов амплификации на форезе
Если продуктов несколько, необходима очистка целевого продукта из геля
Для коротких ПЦР фрагментов (100−150 по) очистка на магнитных частицах и из геля даёт низкий выход
Концентрация очищенного ампликона — не менее 20 нг/мкл; в комментарии к заявке необходимо указать метод очистки и буфер для элюции
Количество очищенного ампликона — 10 мкл на 2 праймера, плюс 4 мкл на каждый дополнительный праймер
Для ферментной очистки и очистки на магнитных частицах необходимо от 10 мкл ПЦР-смеси на два праймера и по 4 мкл на каждый новый праймер
Для очистки через электрофорез необходимо 50 мкл ПЦР-смеси
Оптимальная температура отжига 58−62°С, оптимальная длина — 20 букв, нельзя использовать вырожденные или флуоресцентно меченные праймеры
При подборе праймеров стоит учесть — читаемый сиквенс начинается в лучшем случае через 30 букв после праймера, а ПЦР фрагменты хорошо секвенируются при длине более 150 букв
Нам будет удобно, если в заявке будут указаны последовательности праймеров
Концентрация праймеров — 5 мкМ
Количество праймеров — из расчёта по 4 мкл на каждый образец, но не меньше 10 мкл
Праймеры необходимо передавать отдельно от образцов
Можно бесплатно использовать праймеры из нашей коллекции
После получения заявки пришлём номер заказа для отслеживания.
Образцы забираем курьером по Москве, c 8 до 16 по будням. Можно привезти образцы на проходную Института медицины труда самостоятельно — пр‑т Будённого, д.31, с 10 до 18 по будням.
Образцы возьмём в работу сразу, если они доставлены до 14:00. Если позже — то на следующий рабочий день.
Срок выполнения заказа от 3 до 10 рабочих дней.
Для ускорения обратной связи можно указать аккаунт в Телеграм, если номер не привязан.